在實(shí)驗(yàn)室里，遇到 “難搞” 的樣本總讓人頭疼：粘稠的血漿像膠水一樣難吸，含細(xì)胞碎片的混懸液容易堵吸頭，揮發(fā)快的有機(jī)溶劑剛移完體積就變少…… 這些復(fù)雜樣本靠手工移液全憑經(jīng)驗(yàn)，稍有不慎就出錯(cuò)。其實(shí)，移液工作站只要調(diào)對參數(shù)、用對策略，再 “難纏” 的樣本也能輕松搞定。今天就來聊聊不同復(fù)雜樣本的應(yīng)對技巧，讓工作站變成你的 “智能幫手”。

移液工作站

一、高粘度樣本：慢一點(diǎn)，預(yù)濕潤更穩(wěn)當(dāng)
很多人移取甘油、血清、蛋白溶液時(shí)，發(fā)現(xiàn)吸液體積總是比設(shè)定值少，這是因?yàn)楦哒扯纫后w流動(dòng)慢，快速吸液會(huì)導(dǎo)致吸頭內(nèi)形成空泡。正確做法是：先在工作站軟件里把吸液速度調(diào)低—— 比如水相液體常用 50μL / 秒，粘稠液體調(diào)到 20μL / 秒以下，給液體足夠時(shí)間流入吸頭。同時(shí)打開 “預(yù)濕潤吸頭” 功能：讓吸頭先吸一次液體再排掉，相當(dāng)于給吸頭 “涂一層保護(hù)膜”，第二次吸液時(shí)殘留量能減少 60%。
舉個(gè)例子，某實(shí)驗(yàn)室處理 200cP 粘度的抗體溶液，一開始按默認(rèn)參數(shù)移液，10μL 樣本實(shí)測只有 8.5μL。后來將吸液速度降到 15μL / 秒，預(yù)濕潤次數(shù)設(shè)為 2 次，誤差就縮小到 0.3μL 以內(nèi)。另外，如果工作站支持正壓置換式移液模式（活塞直接接觸液體），處理高粘度樣本時(shí)記得切換，比傳統(tǒng)空氣置換式更穩(wěn)定，尤其適合 10μL 以下的微量操作。

二、含顆粒 / 混懸液：防堵塞要 “軟硬兼施”
細(xì)胞懸液里的細(xì)胞團(tuán)、磁珠提取液里的小顆粒，最容易堵住吸頭小孔。這時(shí)候需要從硬件和參數(shù)兩方面下手：硬件上選擇孔徑更大的吸頭（比如標(biāo)有 “顆粒兼容” 的型號），或者給工作站加裝過濾裝置；參數(shù)設(shè)置上，吸液時(shí)讓吸頭深入液面下 5-8mm（比常規(guī)深 2-3mm），避免液面波動(dòng)吸入空氣泡，排液時(shí)留 10% 的 “緩沖體積”—— 比如設(shè)定排液 100μL，實(shí)際只排 90μL，剩下的 10μL 帶著顆粒留在吸頭里，防止堵塞。
還有個(gè)小技巧：移取磁珠混懸液時(shí)，提前在工作站里添加 “震蕩步驟”—— 吸液前讓試劑架震蕩 5 秒，讓磁珠均勻分散，吸液過程中用 “間歇式吸液”（吸 10μL 停 0.5 秒再繼續(xù)），避免顆粒沉積。某實(shí)驗(yàn)室用這套方法處理含磁珠的核酸提取液，吸頭堵塞率從原來的 30% 降到 5%，再也不用頻繁暫停實(shí)驗(yàn)清理吸頭了。

三、微量 / 易揮發(fā)樣本：精度優(yōu)先，細(xì)節(jié)為王
移取 1μL 以下的微量液體（如熒光染料、酶制劑），或者乙醇、DMSO 這類易揮發(fā)液體時(shí)，關(guān)鍵是減少 “看不見的損失”。首先選擇非接觸式移液模式（比如聲波移液），不用吸頭直接接觸液體，皮升級體積也能精準(zhǔn)控制；如果設(shè)備不支持，就用空氣置換式的 “慢吸慢排” 模式，吸液后讓吸頭在液面停留 1 秒（防止液體掛壁），排液時(shí)接觸孔板內(nèi)壁緩慢推出，殘留量能控制在 0.1μL 以下。
易揮發(fā)液體的 “隱形殺手” 是溫度和空氣暴露時(shí)間。移液前把試劑放在帶溫控的模塊里（比如 25℃恒溫），減少揮發(fā)；在工作站軟件里勾選 “最小化空移時(shí)間”，讓機(jī)械臂走最短路徑，縮短吸頭暴露在空氣中的時(shí)間。實(shí)測移取 DMSO 時(shí)，這套操作能讓體積誤差從 5% 降到 1.5%，再也不用擔(dān)心因?yàn)閾]發(fā)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)波動(dòng)了。

四、深孔板 / 不規(guī)則容器：液面監(jiān)測是 “眼睛”
處理深孔板（孔深超過 20mm）或者離心管、錐形瓶等不規(guī)則容器時(shí)，靠默認(rèn)參數(shù)很容易吸空或觸底。這時(shí)候一定要打開工作站的激光液面檢測功能：它會(huì)像 “掃描儀” 一樣，先自動(dòng)探測每個(gè)孔的液面高度，再調(diào)整吸頭下降深度。比如檢測尿液樣本時(shí)，不同孔的液面可能相差 3-5mm，液面監(jiān)測能讓吸頭精準(zhǔn)停在液面下 2mm 處，既吸到足夠液體，又避免吸到孔底的沉淀。
如果工作站沒有激光檢測，也可以用 “壓力感應(yīng)法”：吸液時(shí)讓活塞緩慢下降，當(dāng)壓力傳感器檢測到液體阻力（即吸頭接觸液面），立即停止下降并開始吸液。雖然速度稍慢，但能避免傳統(tǒng) “固定深度吸液” 的盲目性，尤其適合初次使用的新規(guī)格耗材。

五、特殊場景：提前 “摸底”，定制流程
遇到從未處理過的樣本（比如新研發(fā)的納米顆?；鞈乙海瑒e急著直接上程序，先做個(gè) “預(yù)實(shí)驗(yàn)”：用工作站的 “單通道測試” 功能，分別嘗試不同的吸液速度（10μL/s、20μL/s、30μL/s）和排液停頓時(shí)間（0.1 秒、0.3 秒、0.5 秒），用天平稱量實(shí)際移液體積，找到誤差最小的組合。比如某實(shí)驗(yàn)室研發(fā)脂質(zhì)納米粒時(shí)，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)吸液速度 25μL/s、排液后停頓 0.2 秒，能讓 10μL 樣本的誤差穩(wěn)定在 ±0.2μL。
另外，復(fù)雜樣本往往需要 “組合操作”：比如移取細(xì)胞懸液時(shí)，先低速吸液保護(hù)細(xì)胞，再高速排液減少殘留；處理有毒樣本時(shí)，在程序里加入 “吸頭自動(dòng)丟棄” 和 “紫外消殺” 步驟，避免手動(dòng)接觸風(fēng)險(xiǎn)?，F(xiàn)代工作站的軟件大多支持自定義流程，把這些特殊需求編進(jìn)程序，下次直接調(diào)用，再復(fù)雜的樣本也能 “一鍵搞定”。

處理復(fù)雜樣本的核心原則是 “因材施教”：高粘度樣本靠速度和預(yù)濕潤，顆粒樣本靠防堵和震蕩，微量樣本靠精度和細(xì)節(jié)，深孔板靠液面監(jiān)測。每次遇到新樣本，花 10 分鐘做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)，記錄最佳參數(shù)，慢慢就能積累出一套專屬的 “復(fù)雜樣本處理方案”。記住，工作站不是冰冷的機(jī)器，而是能根據(jù)你的需求 “靈活變通” 的助手，摸透它的 “脾氣”，再難的樣本也能輕松應(yīng)對，實(shí)驗(yàn)效率自然越來越高！

相關(guān)閱讀推薦

體外DNA擴(kuò)增的原理與方法

文庫擴(kuò)增什么意思？如何理解文庫擴(kuò)增的概念？

靶向測序和高通量測序的區(qū)別

實(shí)驗(yàn)室文庫構(gòu)建的目的和意義

清洗微孔板的具體步驟是什么

全自動(dòng)移液工作站哪個(gè)品牌好