下一代測(cè)序（NGS）技術(shù)已經(jīng)成為生命科學(xué)研究和臨床診斷的重要工具，而文庫建庫作為NGS流程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接影響測(cè)序質(zhì)量和結(jié)果可靠性。傳統(tǒng)手工建庫操作繁瑣且易出錯(cuò)，自動(dòng)化平臺(tái)成為提升效率和準(zhǔn)確性的必然選擇。Opentrons的Flex平臺(tái)以其高精度和靈活性，助力實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)NGS文庫建庫全過程自動(dòng)化。
本文將詳細(xì)介紹如何使用Flex平臺(tái)完成從樣本準(zhǔn)備到最終文庫生成的完整流程，幫助您高效、精準(zhǔn)地完成NGS建庫任務(wù)。

移液工作站

一、樣本準(zhǔn)備與初始上樣
在Flex平臺(tái)上，首先將提取的DNA或RNA樣本放置于合適的微孔板中。利用Flex平臺(tái)的多通道移液功能，準(zhǔn)確將樣本分裝到建庫板的指定孔位，同時(shí)自動(dòng)加入相應(yīng)的緩沖液和酶液，為后續(xù)反應(yīng)做好準(zhǔn)備。
平臺(tái)支持自定義體積和移液速度，確保樣本處理的均一性和穩(wěn)定性。

二、DNA片段化與末端修復(fù)
Flex平臺(tái)可自動(dòng)執(zhí)行DNA片段化步驟，結(jié)合物理或酶學(xué)方法，使DNA片段符合建庫需求。隨后進(jìn)行末端修復(fù)和加A尾處理，平臺(tái)精準(zhǔn)控制試劑添加和反應(yīng)時(shí)間，保證文庫片段的完整性和適合后續(xù)接頭連接。

三、接頭連接
通過Flex平臺(tái)的自動(dòng)化移液和溫控模塊，完成接頭的高效連接。系統(tǒng)確保反應(yīng)條件的精準(zhǔn)控制，降低接頭二聚體和非特異產(chǎn)物的生成，提高文庫質(zhì)量。

四、磁珠純化與文庫洗脫
Flex平臺(tái)集成磁力模塊，自動(dòng)完成磁珠結(jié)合、洗滌和洗脫步驟。磁珠純化不僅能去除雜質(zhì)，還能回收目標(biāo)文庫片段。自動(dòng)化流程減少人為操作，提升純化效率和一致性。

五、PCR擴(kuò)增
Flex平臺(tái)利用溫控模塊，自動(dòng)完成PCR擴(kuò)增反應(yīng)。用戶可設(shè)置循環(huán)數(shù)和溫度梯度，確保文庫獲得足夠的量，同時(shí)避免過度擴(kuò)增帶來的偏差。

六、文庫質(zhì)控與儲(chǔ)存
完成擴(kuò)增后，F(xiàn)lex平臺(tái)可協(xié)助用戶完成文庫的體積調(diào)整和儲(chǔ)存準(zhǔn)備。部分流程還可對(duì)文庫進(jìn)行初步質(zhì)控操作，為后續(xù)測(cè)序做準(zhǔn)備。

七、軟件與流程管理優(yōu)勢(shì)
Flex平臺(tái)配套的軟件界面支持全流程的自動(dòng)化腳本設(shè)計(jì)和參數(shù)調(diào)整，用戶無需編程即可快速設(shè)置建庫流程。流程執(zhí)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，確保每一步都符合預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)，操作數(shù)據(jù)自動(dòng)記錄，方便追溯與優(yōu)化。

使用Opentrons的Flex平臺(tái)完成NGS文庫建庫全過程，實(shí)現(xiàn)了從樣本分裝、片段化、接頭連接、磁珠純化到PCR擴(kuò)增的全自動(dòng)操作。該平臺(tái)不僅大幅提升實(shí)驗(yàn)效率和通量，還顯著提高了建庫的重復(fù)性和準(zhǔn)確性，適合臨床、科研及商業(yè)測(cè)序?qū)嶒?yàn)室。

如需了解更多Flex平臺(tái)在NGS建庫中的應(yīng)用細(xì)節(jié)或預(yù)約產(chǎn)品演示，歡迎聯(lián)系Opentrons技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)。

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