MALDI-TOF 是一種 “軟電離 ”技術(shù),非常適合分析蛋白質(zhì)和肽等大型生物分子,而不會造成碎裂。通過將樣品與基質(zhì)混合并使用激光脈沖,它可以使樣品離子化。它的主要優(yōu)勢在于能夠快速分析大分子,因此在蛋白質(zhì)組學和微生物鑒定方面特別有用。
ESI 的工作原理是將樣品溶液通過高壓針,產(chǎn)生帶電液滴,從而產(chǎn)生離子。它的多功能性非常突出,可以電離從小分子到大蛋白質(zhì)的各種化合物。ESI 與液相色譜法(LC)兼容,可實現(xiàn)無縫分離和后續(xù) MS 分析,是代謝組學和脂質(zhì)組學的首選。
MS/MS 分為兩個階段,首先分離離子,然后對選定的離子進行碎片化,最后對碎片進行分析。其優(yōu)勢在于提供詳細的結(jié)構(gòu)信息,尤其是肽的結(jié)構(gòu)信息。通過瞄準特定離子并監(jiān)測其碎片,MS/MS 提供了無與倫比的特異性和精確性,使其在蛋白質(zhì)組學和精確定量分析方面具有無可估量的價值。
為質(zhì)譜分析準備生物樣本的過程。這包括從復雜混合物中提取、純化和濃縮相關(guān)分子。其主要目的是確保樣品的形態(tài)適合質(zhì)譜分析,不含可能干擾質(zhì)譜讀數(shù)的污染物,并且濃度足以被檢測到。
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氣相色譜-質(zhì)譜儀專門分析揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性化合物。它融合了氣相色譜法的分離能力和質(zhì)譜法的鑒定能力,通常用于法醫(yī)、環(huán)境監(jiān)測和風味分析。它的優(yōu)勢在于利用完善的庫對有機化合物進行精確鑒定。
液相色譜-質(zhì)譜法將質(zhì)譜法的適用范圍擴展到熱敏性和非揮發(fā)性化合物。通過將液相色譜的廣泛分離能力與詳細的質(zhì)譜分析相結(jié)合,液相色譜-質(zhì)譜法在蛋白質(zhì)組學、藥物開發(fā)和代謝物分析中變得非常有價值。它能夠處理更大、更多樣的分子,彌補了 GC-MS 的不足。
GC-MS | LC-MS | |
概述 | 氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用 | 液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用 |
樣品類型 | 揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物 | 非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定化合物 |
電離技術(shù) | 電子轟擊電離(EI)、化學電離(CI) | 電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學電離(APCI) |
應用 | 法醫(yī)學、環(huán)境監(jiān)測、藥物檢測、風味分析 | 蛋白質(zhì)組學、藥物開發(fā)、代謝產(chǎn)物分析 |
復雜性與維護 | 中等;維護主要集中在柱子和質(zhì)譜的條件上 | 較高;可能出現(xiàn)柱子堵塞和污染 |
分辨率 | 高(取決于柱子和儀器) | 高(取決于柱子和儀器) |
典型用途 | 藥物檢測、環(huán)境污染物、代謝組學 | 生物分子、肽類、藥物、大型有機分子 |
檢測器靈敏度 | 對揮發(fā)性化合物靈敏度高 | 靈敏度高,尤其是現(xiàn)代檢測器,適用于更廣泛的化合物 |
優(yōu)點 | 對各種揮發(fā)性有機化合物有效,方法成熟且具有完善的數(shù)據(jù)庫 | 適用范圍廣,可以處理較大和更多樣的化合物 |
局限性 | 僅限于揮發(fā)性和熱穩(wěn)定化合物,電離時可能產(chǎn)生碎片化使光譜復雜化 | 由于多步驟操作,可能導致樣品損失或降解,靈敏度可能受基質(zhì)效應影響 |
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