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樣品鋪板

將液體或固體樣品轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基或表面(通常是培養(yǎng)皿或多孔板)上,以進(jìn)行生長、分析或進(jìn)一步實驗的過程。

哪些工作流程需要進(jìn)行樣品鋪板?

樣品鋪板的主要目的是分離、培養(yǎng)和計數(shù)微生物,或培養(yǎng)細(xì)胞用于分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的各種實驗和分析。樣品鋪板通常用于各種工作流程,例如:

  1. 微生物培養(yǎng),用于分離和鑒定特定的細(xì)菌或真菌物種。
  2. 分子生物學(xué)中的細(xì)胞培養(yǎng)研究,用于基因表達(dá)、藥物測試或其他細(xì)胞檢測。
  3. 蛋白質(zhì)組學(xué)實驗,研究蛋白質(zhì)在固相上的相互作用或活動。
  4. 菌落 PCR 和其他基因篩選方法。
  5. 抗菌藥物藥敏試驗。

常用的樣品鋪板方法

樣品鋪板方法有幾種,每種方法都有特定的用途,具體取決于實驗?zāi)繕?biāo):


劃線接種

目的:從混合樣本中分離出單個菌落。

操作步驟:使用接種環(huán),按特定模式(通常為三至四個象限)將樣品涂抹在瓊脂表面。目的是稀釋樣本,以便在最后一個象限時,單個細(xì)胞分別沉積在瓊脂上,從而在培養(yǎng)后形成分離的菌落。

進(jìn)一步了解劃線接種


傾注平板法

目的:與“涂布平板法”相同。

操作步驟:將一定量的液體樣本與熔化的瓊脂培養(yǎng)基混合,然后倒入培養(yǎng)皿中。瓊脂凝固后,微生物會嵌入其中,并在瓊脂表面和內(nèi)部形成菌落。

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點接種法

目的:用于檢測、比較生長研究或快速篩選。

操作步驟:在瓊脂平板表面放置少量不同的樣品作為單個斑點。這種方法可用于快速比較生長條件或同時檢查多個菌株或處理方法。

進(jìn)一步了解點接種法


涂布平板法

目的:計數(shù)樣本中的微生物數(shù)量或培養(yǎng)分離的菌落。

操作步驟:用移液管將一定量的液體樣本(通常是事先稀釋過的)吸到瓊脂平板的中央。使用無菌彎棒(通常是玻璃棒)或細(xì)胞擴(kuò)增器將樣品均勻地鋪滿整個瓊脂表面。


滴板法

目的:“點接種法”的一種變體,但體積較小。

操作步驟:在瓊脂平板上滴一小滴樣品(通常為 5-10 微升)。通常用于快速目測或檢測活力。


復(fù)制平板法

目的:將多個菌落從一個平板轉(zhuǎn)移到另一個平板,并保持相同的空間排列。

操作步驟:將裝有菌落的主平板壓在無菌絨布或類似材料上。然后將一個新的瓊脂平板壓在同塊天鵝絨上,將每個菌落中的一些細(xì)胞以相同的空間模式轉(zhuǎn)移到新的平板上。


為什么樣品鋪板很難?

  1. 技術(shù)敏感性: 正確的分離和生長需要始終如一的溫和技術(shù),以防止細(xì)胞或菌落受損。
  2. 交叉污染: 始終存在從環(huán)境或其他樣本中引入污染物的風(fēng)險。
  3. 體積準(zhǔn)確性: 確保樣品的精確體積對于某些定量分析至關(guān)重要。

樣品鋪板從未如此簡單

OT-2 是一款臺面式液體工作站,設(shè)計方便靈活,可自動處理許多常見應(yīng)用。

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協(xié)議亮點

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與手動相比,自動化樣品鋪板的優(yōu)勢如下:

  1. 一致性: 自動化系統(tǒng)可確保多個樣品的鋪板過程保持一致。
  2. 高通量: 自動化大大縮短了大量樣品的鋪板時間。
  3. 降低污染風(fēng)險:減少人工干預(yù),降低污染風(fēng)險。
  4. 準(zhǔn)確性: 自動化系統(tǒng)確保精確的液體分配和均勻的涂布,從而獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。

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