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梯度稀釋

許多生物或化學(xué)實(shí)驗(yàn)涉及濃度范圍很廣的物質(zhì)，在這種情況下，梯度稀釋是一種常用的技術(shù)。與直接稀釋一樣，確保準(zhǔn)確的移液體積至關(guān)重要。然而，在涉及多個(gè)移液步驟時(shí)很容易出錯(cuò)。

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實(shí)驗(yàn)失敗的常見原因

盡管在原理上，制備梯度稀釋相對簡單，但許多后續(xù)實(shí)驗(yàn)由于以下三種方式中的錯(cuò)誤而失?。?/p>

  • 移液不準(zhǔn)確——由于梯度稀釋中的每一次稀釋都是在前一次稀釋的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，因此隨著梯度稀釋的進(jìn)行，不準(zhǔn)確的移液或移液效果會被放大 
  • 錯(cuò)孔——梯度稀釋涉及多個(gè)移液步驟，按照復(fù)雜的模式從特定孔移入或移出，因此會比一般實(shí)驗(yàn)更容易出錯(cuò)
  • 混合不一致——一個(gè)濃度水平上的不完全混合會影響所有后續(xù)濃度，因?yàn)槊總€(gè)濃度都是建立在前一個(gè)濃度的基礎(chǔ)上的

節(jié)省時(shí)間，避免錯(cuò)誤

為了避免手動(dòng)移液帶來的繁瑣和錯(cuò)誤，考慮使用液體處理工作站。使用 Opentrons Protocol Library，可以輕松創(chuàng)建協(xié)議 —— 這是一個(gè)免費(fèi)的協(xié)議集合，提供可下載的配置以滿足特定體積要求。Opentrons Flex 自定義梯度稀釋協(xié)議可以確保一致且準(zhǔn)確的稀釋結(jié)果，免除手動(dòng)移液的重復(fù)性和勞動(dòng)密集型工作。

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梯度稀釋 vs. 直接稀釋

梯度稀釋和直接稀釋都會產(chǎn)生一定范圍的濃度。然而，它們的主要區(qū)別在于方法不同：

  • 梯度稀釋：每個(gè)濃度都是通過稀釋前一個(gè)濃度而產(chǎn)生的。這種方法可以在更大的濃度范圍內(nèi)進(jìn)行精確稀釋。例如，如果第一列中的儲備溶液稀釋了 11 倍（每次系數(shù)為 3），則最后一列的稀釋倍數(shù)為 3(11) = 177,147 倍。
  • 直接稀釋：所有濃度都是從單一的儲備溶液中提取不同的量。這種方法更易于設(shè)置，而且不會出現(xiàn)因錯(cuò)誤而影響所有后續(xù)濃度的風(fēng)險(xiǎn)。

協(xié)議亮點(diǎn)

Opentrons 為 OT-2 和 Opentrons Flex 提供開源協(xié)議，幫助您實(shí)現(xiàn)梯度稀釋的自動(dòng)化。

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