大家好，我是 Ethan，Opentrons的技術(shù)支持負(fù)責(zé)人，本系列視頻是 0T-2從開箱到協(xié)議運(yùn)行系列的第六期。在上期視頻中，我們完成了甲板校準(zhǔn)，接下來讓我們開始在 OT-2 上進(jìn)行吸頭長度校準(zhǔn)，在吸頭長度和移液器偏移校準(zhǔn)操作中，我需要用到校準(zhǔn)鋁塊，我用到的吸頭有:20ul和1000ul的型號，我需要用到計(jì)算機(jī)和 OT-2，移液器已經(jīng)連接上OT2了，這一步在上期視頻已經(jīng)完成了，吸頭長度校準(zhǔn)說明了吸頭如何適配特定物理移液器的噴嘴，只要校準(zhǔn)完成，OT-2 就可以知道如何在協(xié)議運(yùn)行時移液器的上下以及遠(yuǎn)近移動，從而使吸頭保持在正確的高度，吸頭長度校準(zhǔn)不用考慮各個吸頭之間的差異，OT-2 假定每個吸頭與同一型號的其他吸頭具有-致的長度，我將用到設(shè)備應(yīng)用程序和 Opentrons 應(yīng)用程序來啟動校準(zhǔn)。

首先選擇我要校準(zhǔn)的設(shè)備，只要我沒有完成校準(zhǔn)，這里就會提示，提醒我完成移液器偏移校準(zhǔn)或吸頭連接校準(zhǔn)。現(xiàn)在我點(diǎn)擊校準(zhǔn)，當(dāng)您第一次開始校準(zhǔn)吸頭長度和移液器偏移的時候設(shè)備會詢問您是否需要用到校準(zhǔn)鋁塊，如果您沒有校準(zhǔn)鋁塊，您可以使用垃圾槽替代，我現(xiàn)在有這個鋁塊，所以我會用鋁塊來校準(zhǔn)，我會點(diǎn)擊記住我的選擇以備下次使用，這樣它下次就不會提示了。

　　我將繼續(xù)使用校準(zhǔn)塊，OT-2現(xiàn)在將回到起始狀態(tài)并為校準(zhǔn)做好準(zhǔn)備，我需要一個吸頭架，最好是 0pentrons 的，和一個校準(zhǔn)鋁塊，我擺好了，讓我們開始校準(zhǔn)。Opentrons 應(yīng)用程序?qū)⒁龑?dǎo)我完成校準(zhǔn)吸頭長度校準(zhǔn)，我需要把校準(zhǔn)鋁塊和吸頭架擺在對應(yīng)的板位上，移液器Z軸移動到校準(zhǔn)塊以測量噴嘴，我需要向下移動移液器，以確保噴嘴與校準(zhǔn)塊的距離小于1毫米，此時噴嘴距離校準(zhǔn)塊不到1毫米，我會保存此校準(zhǔn)結(jié)果，移液器將移至吸頭架中的第一個吸頭位置以拾取吸頭，我需要放下移液器，以確保移液器噴像APP士動畫展示的那樣對齊。

噴嘴已對齊，我要讓移液器拿起吸頭，我的移液器能夠拿起吸頭，單擊移動以測量吸頭長度按鈕，移液器將移回校準(zhǔn)塊以測量吸頭長度，我需要將移液器移在一個小支架上，以確保它離校準(zhǔn)塊的距離小于1毫米，噴嘴距離校準(zhǔn)塊1毫米，現(xiàn)在我將保存吸頭長度設(shè)置，我將移除校準(zhǔn)塊以繼續(xù)進(jìn)行移液器偏移校準(zhǔn)，移液器偏移權(quán)準(zhǔn)補(bǔ)償兩個移液器之間的距離，基于 OT-2 和移液器的制造差異，每個移液器都有自己的移液器偏移量，我需要校準(zhǔn)以確保最高精度的 OT-2 已經(jīng)附有吸頭，所以它將用于校準(zhǔn)過程，該應(yīng)用程序?qū)⒁龑?dǎo)我完成每個移液器的校準(zhǔn)。移液器校準(zhǔn)的過程與甲板校準(zhǔn)類似，首先移動到插槽 5-以測量Z通道，然后我將移動它，使移液器與甲板的距離小于 0.1 毫米，z軸位置距離甲板小于1毫米，我將保存此校準(zhǔn)，移液器將移動到板位1中的十字。

與甲板校準(zhǔn)類似，我需要對齊移液器，使吸頭未端位于插槽1中十字的中間，我的一開始有點(diǎn)偏，慢慢移動，這樣就對齊了，我將移液器與十字對齊，現(xiàn)在可以保存校準(zhǔn)，當(dāng)“綠色鉤子”和移液器偏移完成消息出現(xiàn)時，說明校準(zhǔn)完成了。我會讓移液器將吸頭放回吸頭架，然后繼續(xù)下一個校準(zhǔn)，OT-2 現(xiàn)在復(fù)位了，到這里左支架上的 P20 移液器的吸買長度校準(zhǔn)和偏移校準(zhǔn)已完成，我現(xiàn)在要用 P1000 移液器執(zhí)行相同的過程。首先，我要把 20 μl吸頭架從甲板上拿下來，并把它放在一邊，我現(xiàn)在將在右側(cè)啟動吸頭長度校準(zhǔn)和移液偏移校準(zhǔn)。我進(jìn)入設(shè)備頁面的時候可以看到，由于我之前沒有校準(zhǔn)過右側(cè)的移液支架，有一條提示說我現(xiàn)在需要校準(zhǔn)它，我現(xiàn)在點(diǎn)擊校準(zhǔn)，
　　
　　應(yīng)用程序會指導(dǎo)我如何進(jìn)行吸頭長度和移液器偏移校準(zhǔn)，和上次一樣，我需要與移液器相關(guān)聯(lián)的吸頭架，在這種情況下它是 1000 μl 吸頭架，我需要校準(zhǔn)鋁塊，這些我都有，這次校準(zhǔn)開始了，我需要將校準(zhǔn)塊放在板位1中，在右側(cè)。然后我需要將吸頭架放在板位8中，和之前一樣，在板位8中取下頂部的吸頭架，校準(zhǔn)鋁塊放在板位1中，我們現(xiàn)在可以確認(rèn)放置并繼續(xù)校準(zhǔn)，P1000 移液器將下降到校準(zhǔn)鋁塊，就像之前的步驟一樣，我需要將它緩慢地移動下來，使噴嘴接近但不接觸到校準(zhǔn)鋁塊，移液器噴嘴離校準(zhǔn)鋁塊不到 0.1 毫米的距離了，我將保存這個設(shè)置，然后繼續(xù)拾起一個吸頭，我現(xiàn)在需要定位移液器，使其位于吸頭 A1的中心，移液器的噴嘴現(xiàn)在位于吸頭 A1 的中心，并且與吸頭的頂部齊平，我現(xiàn)在要讓移液器拿起那個吸頭，應(yīng)用程序詢問我移液器是否能夠拾取吸頭，已經(jīng)成功拾取了，點(diǎn)擊確定，然后開始測量吸頭長度。

我們將移動到板位1中的校準(zhǔn)塊，慢慢移動，使吸頭接近但不要接觸到校準(zhǔn)鋁塊，完美！它現(xiàn)在停留在距離校準(zhǔn)鋁塊不到 0.1毫米的距離，我現(xiàn)在將保存這個長度，現(xiàn)在吸頭長度已校準(zhǔn)完成，應(yīng)用程序上有一個“綠色鉤子”標(biāo)記，我現(xiàn)在需要從甲板上取下校準(zhǔn)鋁塊，并繼續(xù)進(jìn)行移液器偏移校準(zhǔn)，所以我會選擇繼續(xù)進(jìn)行下一步操作，就像甲板校準(zhǔn)和之前的移液器偏移校準(zhǔn)一樣，我需要降低移液器，使其距離板位5中的甲板不到 0.1毫米，移液器吸頭已經(jīng)無限接近5號板位的甲板了，距離不到 0.1毫米。我將保存此校準(zhǔn)結(jié)果，移液器將移動到第一個板位邊緣，我現(xiàn)在需要點(diǎn)擊移動機(jī)器人，直到吸頭正位于第一個板位中的十字中心?，F(xiàn)在吸頭精確地位于第一個板位的的十字上，保存校準(zhǔn)結(jié)果，我知道移液器偏移校準(zhǔn)已完成，因?yàn)槠聊簧嫌幸粋€“綠色鉤子”。我現(xiàn)在讓移液器將吸頭放回吸頭架并退出校準(zhǔn)。OT-2復(fù)位，吸頭長度和移液器偏移校準(zhǔn)已完成。
　　
　　在協(xié)議運(yùn)行之前，我們本期視頻到此結(jié)束，感謝收看本系列的第六期，現(xiàn)在我已經(jīng)校準(zhǔn)了移液器長度和移液器偏移量，接下來我們將繼續(xù)指導(dǎo)如何運(yùn)行協(xié)議。感謝收看，我們下期再見！

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