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應(yīng)用筆記 · 2024年06月29日
利用甲板上的加熱器搖震模塊實(shí)現(xiàn)SARS-CoV-2的中和抗體的自動(dòng)化
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應(yīng)用筆記 · 2024年06月29日
在OT-2上執(zhí)行連續(xù)稀釋
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應(yīng)用筆記 · 2024年06月29日
使用 OT-2 自動(dòng)化移液平臺(tái)進(jìn)行高效核酸提取
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Opentrons 的 COVID-19 檢測(cè)系統(tǒng)可以幫助運(yùn)行公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室立即擴(kuò)大規(guī)模,每天篩查 2,400 次檢測(cè)。
Opentrons 的使命是通過(guò)更廣泛地使用實(shí)驗(yàn)室機(jī)器人來(lái)加速生命科學(xué)的發(fā)展。世界現(xiàn)在比以往任何時(shí)候都更需要這種能力。
大規(guī)模的 COVID-19 檢測(cè)是限制死亡率的最佳方法之一。大規(guī)模檢測(cè)可以快速發(fā)現(xiàn)和隔離感染,限制病毒的傳播并保護(hù)脆弱人群。為了正確調(diào)查人群,需要處理數(shù)百萬(wàn)個(gè) COVID-19 檢測(cè)試劑盒。世界各地的組織都在努力盡快提高其能力。
這就是 Opentrons 為應(yīng)對(duì)這種挑戰(zhàn)而建立的。
Opentrons 的 COVID-19 檢測(cè)系統(tǒng)是運(yùn)行 COVID-19 公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室的最佳解決方案,這些實(shí)驗(yàn)室需要立即擴(kuò)大到自動(dòng)化操作。Opentrons 可以在下訂單后的幾天內(nèi)安裝每天自動(dòng)進(jìn)行多達(dá) 2,400 次測(cè)試的系統(tǒng)。我們目前正在加利福尼亞州帕洛阿爾托的開(kāi)放醫(yī)學(xué)研究所部署這種監(jiān)測(cè)能力,很快還會(huì)有更多監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。
我們可以與任何試劑供應(yīng)商合作,甚至提供最佳和最實(shí)惠的選擇建議。如果您的實(shí)驗(yàn)室需要擴(kuò)大 COVID-19 監(jiān)測(cè)業(yè)務(wù),請(qǐng)通過(guò) covid-19@opentrons.com 與我們聯(lián)系。
Opentrons 和開(kāi)放醫(yī)學(xué)研究所渴望與當(dāng)?shù)睾吐?lián)邦機(jī)構(gòu)合作,確定該系統(tǒng)是否可在緊急使用授權(quán) (EUA) 下用于臨床診斷,并提供測(cè)試帶寬以滿足日益增長(zhǎng)的極高需求。
以下是有關(guān)我們開(kāi)發(fā)的系統(tǒng)以及如何將其部署用于大規(guī)模 COVID-19 測(cè)試的詳細(xì)信息。
測(cè)試過(guò)程
與許多傳染病檢測(cè)一樣,檢測(cè) COVID-19 病毒的檢測(cè)采用定量聚合酶鏈反應(yīng) (qPCR) 技術(shù)。對(duì)于像 COVID-19 這樣的冠狀病毒,該檢測(cè)實(shí)際上是一種逆轉(zhuǎn)錄酶 qPCR (RT-qPCR),因?yàn)樗鼫y(cè)量的是 RNA 而不是 DNA。 RT-qPCR 能夠檢測(cè)從患者樣本中純化的 RNA 中目標(biāo) COVID-19 序列的存在和水平,從而告訴您某人是否被感染,如果被感染,大約感染了多長(zhǎng)時(shí)間。
第一步是收集樣本。收集發(fā)生在醫(yī)生下令進(jìn)行測(cè)試后。醫(yī)院、實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生機(jī)構(gòu)擦拭患者的鼻子或嘴巴,并立即將測(cè)試拭子放入試管中。然后,這些患者樣本被安全地帶到檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。
一旦收集管到達(dá)實(shí)驗(yàn)室,有三個(gè)自動(dòng)化步驟:
1.樣品接種
2.RNA 提取
3.qPCR 設(shè)置
每個(gè)步驟都有指定的 OT-2 工作站(檢測(cè)除外,檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)室提供的 qPCR 儀器上進(jìn)行)。以下是如何在 Opentrons 上實(shí)現(xiàn)流程自動(dòng)化:
站點(diǎn) A – 樣品鋪板:將 96 個(gè)裝有懸浮在失活緩沖液中的患者樣品的收集管放在第一個(gè) Opentrons 機(jī)器人上,重新格式化以提取 RNA。機(jī)器人將樣品和陽(yáng)性對(duì)照從管中移液到深孔板中。
站點(diǎn) A 配置:9,050 美元
p20 + p300 單通道移液器
溫度模塊(主動(dòng)冷卻對(duì)照 RNA)
4x 管架
96 深孔提取板
1x 20ul 架 + 1x 200ul 濾芯吸頭架
站點(diǎn) A 的 OT-2 甲板布局
站點(diǎn) A 的 OT-2 甲板布局
站點(diǎn) A 應(yīng)該位于某種“進(jìn)樣”室。此站點(diǎn)的主要瓶頸通常不是實(shí)際的重新格式化,而是為機(jī)器人貼標(biāo)簽、記錄、開(kāi)蓋和將收集管裝入架子。最好將樣品進(jìn)樣室與進(jìn)行樣品處理的任何空間分開(kāi),以防止污染。一旦樣本和陽(yáng)性對(duì)照 RNA 放入深孔板,即可將其移至 B 站。
B 站 – RNA 提?。?6 個(gè)深孔板(包含樣本)被移至第二個(gè)機(jī)器人,使用磁性微珠進(jìn)行 RNA 提取。這是自動(dòng)化過(guò)程的主要部分,因?yàn)樾枰啻吻逑床襟E才能完全純化 RNA。
B 站配置:7,750 美元
p300 8 通道移液器
磁性模塊
96 深孔提取板
96 孔洗脫板
5 個(gè) 200ul 濾嘴架
2 個(gè) 12 通道試劑容器
2 個(gè) 1 通道液體垃圾容器
還應(yīng)該有一個(gè)專門的提取室,用于安置所有 B 站提取機(jī)器人。如果吞吐量需要,這個(gè)房間還可以容納一個(gè)試劑填充站,為 B 站機(jī)器人準(zhǔn)備磁性微珠和緩沖液,以進(jìn)行 RNA 提取。如您在上面的甲板圖中所見(jiàn),此過(guò)程需要大量試劑和吸頭。
C 站 - 檢測(cè)設(shè)置:從樣本中分離出的 RNA(洗脫)隨后被移至第三個(gè)房間,該房間容納 qPCR 儀器,并設(shè)計(jì)為盡可能“干凈”,以最大限度地減少污染。將裝有純樣本 RNA 的板放在 Opentrons 機(jī)器人上,為 RT-qPCR 檢測(cè)做準(zhǔn)備。
C 站 OT-2 配置:7,500 美元
p20 單通道
Opentrons 溫度模塊
96 孔洗脫板
96 孔 PCR 板
3x 架 20ul 過(guò)濾吸頭
RT-qPCR 所需的試劑分別放置在溫度模塊上進(jìn)行主動(dòng)冷卻。這些試劑被組合成母液混合物,然后被分配到板中并與純化的 RNA 結(jié)合。經(jīng)過(guò)此過(guò)程后,板就可以放入 qPCR 機(jī)器中并分析是否存在 COVID-19。
吞吐量
我們開(kāi)發(fā)了一個(gè)由 8 個(gè)機(jī)器人組成的系統(tǒng)(2 個(gè) A 站、4 個(gè) B 站、2 個(gè) C 站),可以每 12 小時(shí)自動(dòng)準(zhǔn)備 12 個(gè) 96 孔板,或每天大約 2,400 次測(cè)試。
8 個(gè)機(jī)器人系統(tǒng)的過(guò)程時(shí)間安排如下:
該系統(tǒng)加上備件和實(shí)驗(yàn)室安裝費(fèi)用為 100,000 美元,可用于監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。我們可以在 3 月份每周安裝 1 次,然后在 4 月份每周安裝 4 次。如果我們實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),我們有望在 6 月底之前在 Opentrons 系統(tǒng)上自動(dòng)完成 100 萬(wàn)次測(cè)試。
我們目前正在努力在加利福尼亞州帕洛阿爾托的開(kāi)放醫(yī)學(xué)研究所安裝第一個(gè)高通量系統(tǒng),并渴望使用我們的機(jī)器人幫助實(shí)驗(yàn)室完成這個(gè)關(guān)鍵項(xiàng)目。
如果您有興趣與 Opentrons 合作以擴(kuò)展您的實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行 COVID-19 測(cè)試的能力,請(qǐng)聯(lián)系 covid-19@opentrons.com。
經(jīng)驗(yàn)豐富的服務(wù)團(tuán)隊(duì)和強(qiáng)大的生產(chǎn)支持團(tuán)隊(duì)為客戶提供無(wú)憂的訂單服務(wù)。
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