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Opentrons 熱循環(huán)模塊 GEN2 可為您的實驗提供準確均勻的擴增溫度同時維持較低的蒸發(fā)率。
產(chǎn)品說明
Opentrons 熱循環(huán)模塊是一個放置在甲板上的全自動化 的熱循環(huán)儀器,提供了一個96孔板式的全自動 PCR 功能。 熱循環(huán)模塊與所有的 Opentrons 儀器和軟件都兼容,所以 可以在 Opentrons 儀器上實現(xiàn)全自動化的 PCR 前處理和PCR 流程。
Opentrons 熱循環(huán)模塊的孔板上配有自動加熱蓋和可更 換的密封元件,以確保有效的加熱樣品的同時把樣品蒸發(fā) 量降到最低。在熱循環(huán)完成后,通過孔板上升裝置使孔板塊 上升,然后可以手動或者使用機械轉(zhuǎn)板抓手將 PCR 孔板 移出。排氣口將熱循環(huán)儀中的熱空氣排出,并將其導向遠離機器甲板的地方。
性能數(shù)據(jù)
Opentrons對熱循環(huán)模塊 GEN2 進行了一系列嚴格的性能測試,以保障儀器品質(zhì)遵守行業(yè)標準的性能規(guī)范
表 1:在穩(wěn)定狀態(tài)下溫度的準確度和一致性
溫度升降速率(變溫率)
對8個不同的儀器在加熱(到99℃)和冷卻(到4℃)期間測量其平均最大溫度升降速率。每個定點的保持時間為5分鐘。熱循環(huán)儀的最大平均變溫率為4 .45℃/s
性能數(shù)據(jù)
通過用可重復使用的密封元件,多種反應(yīng)體系,96孔 PCR板,對儀器的擴增一致性進行了測試。
使用 Lambda 引物擴增 Lambda DNA,熱循環(huán)參數(shù)如下: 在94℃孵育10分鐘,25個循環(huán),每個循環(huán)分別在94℃ 下擴增15秒和在70 ℃擴增1分鐘,并在72 ℃下延伸7 分鐘。通過使用讀扳機捕獲原始熒光值對每個孔槽的擴增量進行了測量。
通過計算得出變異系數(shù) (CV%) 見表2。數(shù)據(jù)表明,密封圈可以重復使用多達25次,且不會降低性能。在10 μL 和 100μL 反應(yīng)體積下,CV值均保持較低。此外,使用 OT-2的 96孔PCR 板,在10uL 到100uL 這個較大的范圍區(qū)間內(nèi),熱循環(huán)模塊都具有較好的擴增重復性。
低蒸發(fā)率
對 5 0 個不同的熱循環(huán)模塊的蒸發(fā)率進行了評估,在 PCR 96孔板中樣品的體積分別為10μL,20μL,50μL 和100 μL。在 PCR 運行3步前后分別測量了樣品的體積重量;包 括35次循環(huán),每次循環(huán)的設(shè)定溫度和保持時間為:94℃(10 s)、70 ℃(30s)和72℃(30s)。
所有測試樣品體積的平均蒸發(fā)率均<6%,最大樣品體積(100μL)平均蒸發(fā)率均<1%。
數(shù)據(jù)表明,Opentrons 熱循環(huán)模塊 GEN2 有著一致可靠的擴增功能,最小樣品體積損失低至僅10 μL。該模型展示了溫度快速 升降速率和在各種不同的設(shè)定點對溫度的穩(wěn)定保持能力。在重復使用一次性密封圈,使用多種反應(yīng)體積,和無論是否在機制備樣品的情況下,96 孔板的擴增均被證明是一致均勻的。Opentrons 熱循環(huán)儀 GEN2 的 9 6 孔 位 PCR 通過各種測試證明其提供了可重復和準確的擴增結(jié)果,以保證實驗室日常實驗的一致性。
原文地址:移液器白皮書:熱循環(huán)模塊
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