隨著制藥和生物科技行業(yè)不斷創(chuàng)新來滿足患者對療法的需求，新型療法的發(fā)展步伐也在日益加快。業(yè)界已經(jīng)見證了創(chuàng)新帶來的累累碩果，例如細(xì)胞療法和基因療法，它們?yōu)闊o數(shù)的患者帶來了康復(fù)的希望。然而，許多此類療法都需要2-4天的周轉(zhuǎn)時間來確保治療的有效性。就減小此過程期間發(fā)生污染的風(fēng)險而言，平板計數(shù)法等傳統(tǒng)微生物檢測方法力有不逮，因為其培養(yǎng)期至少需要5天才能獲得結(jié)果，檢測能力較低，且實際微生物水平易被低估。

新過程控制策略
平板計數(shù)法的這些局限性已迫使人們重新思考控制策略，以確保過程始終處于控制之下，從而減小發(fā)生污染的風(fēng)險?？焖傥⑸餀z測方法(RMM)，包括過程所用之水，是這種整體過程控制策略的關(guān)鍵。雖然平板計數(shù)法可以在培養(yǎng)期結(jié)束時確認(rèn)水質(zhì)，但利用RMM的測量結(jié)果而知曉過程處于控制之下卻使業(yè)界能夠最大限度地減小在所需周轉(zhuǎn)時間內(nèi)放行產(chǎn)品的風(fēng)險。然而，在完全采用此類RMM之前，業(yè)界一直在尋求監(jiān)管機構(gòu)給出他們的觀點和指導(dǎo)。另一方面，監(jiān)管機構(gòu)則意識到，創(chuàng)新療法的需求要求在原材料的制造、加工和監(jiān)測方面進行創(chuàng)新。在批準(zhǔn)這些創(chuàng)新療法后，監(jiān)管機構(gòu)希望確?；颊叩陌踩粫诏煶讨惺艿綋p害。他們還意識到當(dāng)前經(jīng)驗證微生物檢測方法的局限性，并已表示他們對將其他技術(shù)和方法視為整體過程控制策略的一部分持開放態(tài)度。盡管并非全世界的所有監(jiān)管機構(gòu)和藥典都已對這些關(guān)切作出回應(yīng)，但各種監(jiān)管機構(gòu)和藥典之間的協(xié)調(diào)進程表明，隨著業(yè)界采取全球供應(yīng)視角來看待問題，這種開放性將在全球范圍內(nèi)得到體現(xiàn)。

美國藥典（USP）
USP已意識到傳統(tǒng)平板計數(shù)法的局限性。在第<1223>章中，它以各種表述專門地提及了這些局限性，如下所示：
? “有關(guān)從飲用水和環(huán)境水中回收微生物的研究已經(jīng)表明，將細(xì)胞計數(shù)估計值報告為菌落形成單位(CFU)的傳統(tǒng)平板計數(shù)法可以回收樣本中0.1-1％的實際微生物細(xì)胞?！?br>? “如果提供給微生物的生長、營養(yǎng)或培養(yǎng)條件不足以促成菌落恢復(fù)和菌落生長，那么即使存在活細(xì)胞，結(jié)果也可能是0 CFU或無生長?！笨紤]到這一點，USP鼓勵將其他測量方法和技術(shù)視為整體控制策略的一部分。其中包括：
? 激光誘導(dǎo)細(xì)胞熒光技術(shù)
? 通過固相和流體熒光顯微鏡檢測重要染色細(xì)胞
? 通過生物發(fā)光測量ATP水平
這些方法都是RMM，它們可以通過立即檢測任何超標(biāo)來更快地對任何微生物污染事件作出響應(yīng)。盡管平板計數(shù)法是目前唯一經(jīng)過驗證的用水放行方法，USP和FDA仍鼓勵用戶使用融合了其他技術(shù)的整體過程控制方法。USP <1223>中還提供了統(tǒng)計方法，它們可以在為此類替代測量信號設(shè)置基線和報警限值時使用。

歐洲藥品管理局（EMA）
EMA已旗幟鮮明地表示鼓勵將RMM視為整體過程控制的一部分。EMA在GMP附錄1“關(guān)于注射用水生產(chǎn)的常見問題解答”中強調(diào)了這一立場，并給出了如下聲明：
? “應(yīng)將替代/快速微生物檢測方法的使用作為系統(tǒng)整體控制策略的一部分?！?br>? “應(yīng)將快速微生物檢測方法的使用視為控制策略的一部分，以便為針對系統(tǒng)劣化作出快速響應(yīng)提供幫助?！?br>通過如此明確的關(guān)于如何在整體過程控制中利用RMM的聲明，EMA鼓勵用戶不要單純依賴于平板計數(shù)法。需要再次指出的是，雖然平板計數(shù)法仍是目前唯一經(jīng)過驗證的用水放行方法，但其他方法的驗證也正在研究中，EMA將繼續(xù)鼓勵用戶將RMM納入整體過程控制中。

聯(lián)邦藥品管理局（FDA）
如之前所述，監(jiān)管者們已意識到，傳統(tǒng)的平板計數(shù)法不夠迅速，因此某些已批準(zhǔn)的療法需要重新思考過程控制策略。鑒于FDA調(diào)查人員通常處于執(zhí)行工廠審查的第一線，業(yè)界熱切希望聽到FDA就RMM及其在過程中的使用亮明態(tài)度。FDA的認(rèn)可對充分證明業(yè)界實施RMM的正確性而言至關(guān)重要。

在（美國）貝塞斯達舉行的第14屆PDA全球藥用微生物學(xué)年度大會上的“專家答疑”環(huán)節(jié)期間，F(xiàn)DA代表被問到：“如果我仍在對用水系統(tǒng)進行傳統(tǒng)的平板計數(shù)，但我希望同時運行新的RMM做比對，那么為什么我需要對其進行驗證？這種額外的方式會出現(xiàn)什么問題？”
作為回應(yīng)，F(xiàn)DA專家組坦言十分歡迎這項技術(shù)，并表示PAT倡議鼓勵在采用傳統(tǒng)的經(jīng)驗證方法的同時，使用互補的快速微生物檢測方法以進行整體過程控制。FDA澄清道，就鼓勵新技術(shù)以滿足業(yè)界的需求而言，這是PAT倡議的初衷。只要使用經(jīng)驗證的方法來放行用水，那么當(dāng)用戶探索能更好地控制其過程的方法時，它就可以在實質(zhì)上為用戶提供“避風(fēng)港”。
這清楚地表明了FDA對RMM的態(tài)度。FDA承認(rèn)RMM與其PAT倡議一致，該倡議旨在實現(xiàn)更好的過程控制并減少對過程采集樣本的依賴，采集樣本只有在產(chǎn)品已經(jīng)受到影響時才會揭示問題。
為了進一步明確FDA的立場，一個獨立的過程和環(huán)境檢測方法(PEMM)協(xié)作工作組與FDA的新興技術(shù)團隊進行了會談，共同探討RMM。PEMM的成員包括許多主要制藥行業(yè)利益相關(guān)者以及與RMM有關(guān)的供應(yīng)商。工作組說明了激光誘導(dǎo)熒光(LIF)技術(shù)的優(yōu)勢，并要求FDA就將該技術(shù)用作過程控制工具給出立場聲明。LIF是7000RMS?分析儀中的核心技術(shù)。

關(guān)于使用快速微生物檢測方法的監(jiān)管意見總結(jié)

• USP和EMA鼓勵使用快速微生物檢測的替代性測試方法以進行過程控制
• USP更是強調(diào)了將激光誘導(dǎo)細(xì)胞熒光技術(shù)（即7000RMS中的核心技術(shù)）用作細(xì)胞枚舉的替代方法之一
• FDA鼓勵在采用傳統(tǒng)的經(jīng)驗證方法的同時，將互補的快速微生物檢測方法用作過程控制的一部分。
• 這些方法與PAT倡議的初衷一致

在回應(yīng)中，F(xiàn)DA公開支持將該技術(shù)(LIF)作為與擔(dān)當(dāng)?shù)谝徊降膫鹘y(tǒng)平板計數(shù)法并行使用的過程控制工具。這強調(diào)了他們在PDA大會上的回應(yīng)，他們曾在大會上鼓勵將RMM用作對平板計數(shù)法等傳統(tǒng)經(jīng)驗證方法的補充。此外，與采集樣本相比，RMM系統(tǒng)能夠以高于傳統(tǒng)方法的靈敏度連續(xù)監(jiān)測水中的微生物總量。使用數(shù)據(jù)趨勢預(yù)測和分析功能的連續(xù)微生物監(jiān)測能夠提供實時驗證，而實時驗證則可以用于改善整體過程了解和過程控制。
此外，隨著實時微生物技術(shù)越來越廣泛地用作過程控制工具，F(xiàn)DA表示愿意討論各種方法，以證實該技術(shù)可以用作當(dāng)前經(jīng)驗證方法的潛在替代方案。PEMM工作組和其他業(yè)界組織將繼續(xù)同F(xiàn)DA合作來定義這些驗證程序，從而使RMM可以用作經(jīng)驗證的方法。然而，在此之前，F(xiàn)DA鼓勵將RMM用作與傳統(tǒng)平板計數(shù)法并行的過程控制工具。

越來越多的認(rèn)可和鼓勵
各種機構(gòu)作出的聲明和回應(yīng)清楚地表明，RMM可以在整體過程控制策略中發(fā)揮重要作用。監(jiān)管機構(gòu)鼓勵將它們與平板計數(shù)法等經(jīng)驗證的方法并行使用，以便過程得到主動監(jiān)測且用戶能夠?qū)Τ瑯?biāo)快速作出回應(yīng)，從而防止污染事件。這種對RMM的認(rèn)可對滿足不斷增長的創(chuàng)新療法需求而言至關(guān)重要，因此業(yè)界應(yīng)適應(yīng)其過程以滿足要求。

7000RMS微生物檢測分析儀
提高過程控制和生產(chǎn)效率
每兩秒鐘獲得一次結(jié)果的連續(xù)監(jiān)測可以優(yōu)化系統(tǒng)過程。

以高靈敏性控制產(chǎn)品質(zhì)量
計數(shù)尺寸小至0.3 μm的單個微生物。

最大限度地減小風(fēng)險并降低成本
實時監(jiān)測無需耗費時間來等待結(jié)果。預(yù)測趨勢數(shù)據(jù)使您能夠在超標(biāo)事件發(fā)生之前做出反應(yīng)。

符合全球法規(guī)要求
監(jiān)管機構(gòu)鼓勵使用替代性的快速微生物學(xué)方法。