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為了確保Opentrons Flex 核酸提取工作站這一先進設(shè)備能夠持續(xù)準(zhǔn)確運行,定期進行校準(zhǔn)工作顯得尤為重要。本文旨在深入探討Opentrons Flex 核酸提取工作站的校準(zhǔn)流程,詳細(xì)闡述從校準(zhǔn)前的充分準(zhǔn)備,到執(zhí)行具體校準(zhǔn)步驟的每一個細(xì)節(jié),直至最終生成校準(zhǔn)記錄和報告的全過程。
一、校準(zhǔn)前準(zhǔn)備
1、確保環(huán)境條件:校準(zhǔn)應(yīng)在規(guī)定的環(huán)境溫度(10~30℃)和相對濕度(≤80%)下進行,同時確保環(huán)境中沒有明顯的機械振動和電磁干擾。
2、準(zhǔn)備校準(zhǔn)工具:
(1)超微量分光光度計:用于測量核酸濃度,以驗證提取效率。
(2)振動測量儀:用于測量和校準(zhǔn)工作站的振動頻率。
(3)溫濕度巡檢儀:用于監(jiān)測和記錄環(huán)境溫度和濕度。
(4)電子天平:用于測量取液量的準(zhǔn)確性。
二、校準(zhǔn)步驟
1、溫度校準(zhǔn):
(1)使用溫度測量裝置,將溫度傳感器固定在提取儀的加熱模塊上,確保溫度傳感器與加熱模塊貼合緊密。
(2)根據(jù)提取儀的孔位數(shù),均勻選取測溫點。例如,孔位數(shù)48位96位時選7個測溫點,8位48位時選5個測溫點,8位及以下時選3個測溫點。
(3)設(shè)定被校提取儀的校準(zhǔn)溫度,穩(wěn)定10分鐘或以上,待溫度穩(wěn)定后,讀取測溫點的溫度值。
(4)計算溫度的示值誤差、均勻性和穩(wěn)定性。
2、振動頻率校準(zhǔn):
(1)選取振動頻率校準(zhǔn)點,通常為提取儀頻率設(shè)定最大值的20%(低)、50%(中)、80%(高),或其他有實際需求的振動頻率。
(2)使用振動頻率測量裝置進行測量,待提取儀穩(wěn)定5分鐘后,設(shè)定待測頻率值,分別測量低、中、高提取儀振動頻率的示值。
(3)每個頻率測量3次,計算振動頻率的示值誤差和穩(wěn)定性。
3、取液量校準(zhǔn):
(1)分別設(shè)定提取儀取液量為50μL、100μL、200μL,或其他有實際需要的取液量作為校準(zhǔn)點。
(2)測量取液量的示值誤差、重復(fù)性和一致性。
(3)重復(fù)性測試時,選擇一個通道重復(fù)取液7次,用電子天平稱量所取液體質(zhì)量,換算成體積后計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
(4)一致性測試時,用提取儀的多通道取液器取液一次,分別稱量各通道取液的質(zhì)量,換算成體積后計算取液量的一致性。
4、核酸提取回收率校準(zhǔn):
(1)選擇有證核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用微量分光光度計測量其濃度,取3次測量的平均值作為核酸提取前的初始濃度。
(2)用提取儀對有證核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行核酸提取。
(3)均勻選取測量點進行一致性考察,將每個孔中提取好的核酸樣品溶液,分別用微量分光光度計測量其濃度。
(4)對比提取前后的核酸濃度,計算提取回收率及其一致性和重復(fù)性。
三、校準(zhǔn)記錄和報告
1、記錄校準(zhǔn)數(shù)據(jù):詳細(xì)記錄每一步校準(zhǔn)的數(shù)據(jù)和結(jié)果,包括溫度、振動頻率、取液量和核酸提取回收率的測量值、計算值和誤差等。
2、生成校準(zhǔn)報告:根據(jù)記錄的校準(zhǔn)數(shù)據(jù),生成校準(zhǔn)報告,包括校準(zhǔn)日期、校準(zhǔn)人員、校準(zhǔn)設(shè)備型號和編號、校準(zhǔn)結(jié)果和結(jié)論等信息。
3、評估校準(zhǔn)結(jié)果:根據(jù)校準(zhǔn)報告,評估提取儀的性能是否滿足使用要求。如不滿足,需進行必要的調(diào)整或維修。
Opentrons Flex 核酸提取工作站的校準(zhǔn)是一個系統(tǒng)而細(xì)致的過程,它涵蓋了從校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備到具體步驟的執(zhí)行,再到校準(zhǔn)記錄和報告的生成等多個環(huán)節(jié)。通過嚴(yán)格的校準(zhǔn)流程,我們可以確保工作站的準(zhǔn)確性和可靠性,為后續(xù)的核酸提取實驗提供堅實的基礎(chǔ)。同時,定期的校準(zhǔn)也是保持設(shè)備性能穩(wěn)定、延長使用壽命的重要手段。
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