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在使用自動移液機器人時,即使是國際品牌如 Opentrons,也可能因為使用環(huán)境、耗材差異或長時間運行,出現(xiàn)輕微的移液誤差。為了確保實驗數(shù)據(jù)可靠、試劑使用精確,掌握 如何調校 Opentrons 的移液誤差 是每個實驗室運營者都應具備的實用技能。
本指南將為你系統(tǒng)講解什么情況下需要調校、如何操作、常見誤差原因以及實用建議,幫助你將誤差控制在合理范圍內。
一、什么是移液誤差,為什么需要調校?
移液誤差是指機器人設定吸取的體積與實際吸取體積之間的偏差。影響因素主要包括:
吸頭型號不匹配或質量不佳
液體密度或粘度異常(如含甘油或高鹽)
環(huán)境溫度、濕度波動
長時間運行導致內部結構松動
及時調校能讓設備始終保持高精度,確保加樣一致性、實驗結果可復現(xiàn)。
二、Opentrons支持哪幾種調校方式?
Opentrons 提供兩種主要的誤差調校路徑:
1.軟件調校(通過 Protocol Designer 或 Python 腳本)
適用于需要微調某種吸頭和特定液體的移液效果。
操作入口:Opentrons App → Pipette Settings → Calibrate
可微調參數(shù)包括:
吸液偏移值(aspirate offset)
吸液/排液速度
吸頭深度(liquid height)
優(yōu)點:靈活、可隨任務不同保存多個配置文件
建議對象:中高級用戶、編程用戶
2.使用 CSV 校準文件自定義曲線
適用于大量移液精度優(yōu)化(如從20μL到200μL的多個點測試)
通過測量實際體積與設定值差距后,填寫一份 volume vs correction 的CSV文件導入系統(tǒng)
Opentrons 在后續(xù)運行中會自動應用這組校準曲線
適合復雜液體、特殊容器使用場景(如粘稠試劑、深孔板)
三、何時應該進行誤差調校?
建議在以下情況下進行調校:
更換吸頭品牌或耗材批次
使用非標準液體(高濃度、有機溶劑等)
長期使用后首次實驗失敗
使用第三方自定義模塊(如不同深度容器)
小提示:Opentrons 平臺默認針對 Opentrons 原裝吸頭和純水環(huán)境調校,若偏離太大,建議主動調校以避免誤差積累。
四、快速調校操作流程(以 OT-2 為例)
步驟1:準備工作
分析天平(精度0.1mg以上)
蒸餾水、96孔板或移液容器
Opentrons App 或 Jupyter Notebook 環(huán)境
步驟2:稱重法獲取真實體積
設定吸取體積,如100μL
連續(xù)加樣10次,每次稱重
記錄平均值,與目標值比較差異
步驟3:計算偏差并修改參數(shù)
假設設定為100μL,實際為95μL,誤差為-5%
修改校準曲線或吸液偏移值,使其偏移+5%
步驟4:驗證調校結果
重復加樣稱重,確保誤差控制在 ±1% 以內。
五、常見問題與解決建議
問題可能原因建議操作加液不足吸頭未完全插入或匹配不良更換原裝吸頭或檢查裝配方式液面不一致調速過快或液體太黏稠降低吸液速度,增加滯留時間吸液有泡沫未預濕吸頭增加“預濕”步驟,或設置預吸操作調校后誤差反而加大使用錯誤的單位或文件格式檢查 CSV 文件格式是否匹配要求
六、Opentrons調校的優(yōu)勢
可視化界面:無需代碼也能進行基礎校準
支持自定義吸液邏輯:適配不同容器、試劑
開源架構:可通過 Python 腳本進一步自動化測試與調校
社區(qū)活躍:GitHub 和論壇中有豐富的調校經驗分享
自動移液器的穩(wěn)定性,關系到實驗室自動化的根基。借助 Opentrons 提供的調校工具,即使非專業(yè)工程背景的實驗人員也能快速上手優(yōu)化流程。別讓“移液偏差”成為科研效率的隱形殺手,建議每月定期檢測和必要時校準,保持設備最佳狀態(tài)。
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