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OT-2工作站的蛋白質定量測定

OT-2工作站在蛋白質定量測定中的應用,主要依托其高度自動化的移液、混合、孵育、洗滌等功能,以及與其他檢測設備的無縫集成,這種全方位的自動化能力,極大地促進了蛋白質定量測定流程的高效執(zhí)行,確保了實驗結果的準確性與可重復性,為科研工作者提供了便利。

OT-2工作站的蛋白質定量測定

一、OT-2工作站的自動化操作流程
1、樣品準備:
將待測樣品進行必要的預處理,如裂解、離心等,以獲取蛋白質溶液。
2、程序編寫:
使用Opentrons的軟件(如Opentrons App)編寫自動化實驗程序,設置移液量、混合次數、孵育時間等參數。
3、自動化移液與混合:
OT-2平臺根據程序自動完成樣品的移液、試劑的添加和混合等操作,確保每個步驟的精確性和一致性。
4、孵育:
將混合后的樣品置于溫控模塊中,按照設定的溫度和時間進行孵育,使抗體與抗原充分結合。
5、洗滌:
孵育結束后,OT-2平臺自動進行洗滌步驟,去除未結合的試劑和雜質。
6、信號檢測:
將洗滌后的樣品轉移至檢測儀器(如分光光度計)中,檢測反應后的信號強度。

二、結合蛋白質定量測定方法
OT-2工作站支持多種蛋白質定量測定方法,如考馬斯亮藍法、紫外分光光度法、BCA法、Folin-酚試劑法等。這些方法的化學原理各不相同,但均依賴于蛋白質與特定試劑之間的反應來生成可檢測的信號。
1、考馬斯亮藍法:
考馬斯亮藍染料與蛋白質結合后,在特定波長下(如595nm)的吸光度與蛋白質含量成正比。OT-2工作站可自動完成樣品的加樣、染色、洗滌和吸光度檢測等步驟。
2、紫外分光光度法:
蛋白質中的芳香性氨基酸(如酪氨酸、色氨酸)在紫外光下具有特征吸收峰(如280nm)。OT-2工作站可利用紫外分光光度計檢測樣品在特定波長下的吸光度,從而計算出蛋白質含量。
3、BCA法:
BCA(二喹啉甲酸)試劑在堿性條件下與蛋白質中的銅離子反應,生成紫紅色的復合物。該復合物的吸光度與蛋白質含量成正比。OT-2工作站可自動完成樣品的加樣、試劑添加、孵育和吸光度檢測等步驟。
4、Folin-酚試劑法:
在堿性條件下,Folin-酚試劑與蛋白質中的酪氨酸和色氨酸殘基反應,生成深藍色的鉬藍和鎢藍混合物。其吸光度與蛋白質含量成正比。OT-2工作站同樣可自動化完成該方法的各個步驟。

三、OT-2工作站的優(yōu)勢與特點
1、高精度:
OT-2平臺采用高精度移液器,確保移液量的準確性,減少誤差。
2、高效率:
自動化操作大大縮短了實驗周期,提高了實驗效率。
3、高重復性:
自動化流程減少了人為操作帶來的不確定性,提高了實驗結果的重復性。
4、靈活性:
OT-2平臺可根據實驗需求進行靈活配置,支持多種定量試劑盒和檢測方法。
5、節(jié)省成本:
自動化操作減少了試劑和耗材的浪費,降低了實驗成本。

三、應用實例
以美國哥本哈根大學健康科學學院諾和諾德基金會蛋白質研究中心的研究為例,他們使用Opentrons OT-2自動化移液平臺設計了一種簡單而高效的蛋白質組學樣品制備工作流程,能夠在6小時內處理多達192個樣品。該工作流程通過完全自動化的方式整合了樣品消化、純化和Evotip裝載等環(huán)節(jié),實現了高靈敏度的蛋白質定量測定。

OT-2工作站在蛋白質定量測定中的應用,充分發(fā)揮了其自動化、高精度、高效率和高重復性的優(yōu)勢,為生物醫(yī)學研究、藥物研發(fā)、臨床診斷等領域提供了強有力的支持。隨著技術的不斷進步和應用的深入拓展,OT-2工作站將在更多領域展現出其獨特的價值和潛力。

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