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微孔板作為生物實驗中常用的工具,廣泛應用于酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、細胞培養(yǎng)、藥物篩選等多個領域。為了確保實驗結果的準確性和可靠性,微孔板的清洗工作至關重要,清洗不當可能會導致交叉污染或實驗誤差。
一、準備階段
1、確認孔板材質:首先確認微孔板的材質,因為不同材質的孔板可能需要不同的清洗方法。常見的材質包括聚苯乙烯(PS)和聚丙烯(PP)等塑料材質。
2、準備清洗工具:準備好清洗所需的工具,如移液器、排槍(或吸頭)、洗瓶、吸水紙、試管架等。同時,確保清洗溶液(如PBS緩沖液或其他適當?shù)娜芤海┮呀?jīng)配制好并放置在合適的位置。
二、清洗步驟
1、吸出孔內液體:使用移液器或排槍將孔內的液體吸出,注意不要觸碰到孔底的細胞或殘留物。如果孔內有貼壁細胞,可以使用胰酶消化后吹打成懸液再吸出。
2、加入清洗液:使用排槍向每個孔內加入足量的清洗液,通常為每孔200~300μl(具體體積可根據(jù)實驗需求調整)。注意要沿著孔壁緩緩加入,避免產(chǎn)生氣泡。
3、浸泡與振蕩:讓清洗液在孔內浸泡一段時間(如2~3分鐘),然后輕輕振蕩孔板幾次,或使用搖床進行振蕩,以幫助去除殘留物。
4、吸出清洗液:再次使用移液器或排槍將孔內的清洗液吸出,注意同樣不要觸碰到孔底。如果有必要,可以重復上述清洗步驟一次或多次,直到孔板清洗干凈為止。
5、拍干或風干:將清洗干凈的微孔板放在吸水紙上輕輕拍打幾次以去除殘余的清洗液,或者將其放在超凈臺上晾干。注意不要使用紙巾擦拭孔板底部,以免影響讀數(shù)或造成劃痕。
三、注意事項
1、避免交叉污染:在清洗過程中要注意避免交叉污染,特別是當處理多個不同樣本時。建議每次只處理一個樣本的孔板,并在處理完一個樣本后更換新的移液器吸頭和手套。
2、控制清洗力度:在清洗過程中要注意控制力度,避免過度用力導致孔板損壞或細胞脫落。
3、選擇合適的清洗溶液:根據(jù)實驗需求選擇合適的清洗溶液,并確保其pH值和離子濃度適合細胞生長或后續(xù)實驗。
4、定期維護洗板機:如果使用洗板機進行清洗,需要定期維護設備,如檢查管路是否通暢、是否有漏液現(xiàn)象等,以確保設備的正常運行和清洗效果。
清洗微孔板是一項細致且重要的工作,直接影響到實驗的質量和可靠性。通過合理的清洗步驟,如初步?jīng)_洗、清洗孔板表面、徹底去除清潔劑殘留及正確干燥存儲,可以有效延長微孔板的使用壽命,并保持其性能不受影響。
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