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全自動核酸提取儀工作原理

一、全自動核酸提取儀的概述
全自動核酸提取儀是一種用于分離和純化核酸的儀器。與傳統(tǒng)的提取方法相比,全自動核酸提取儀可以實現(xiàn)快速、高通量的核酸提取,且操作簡便,節(jié)省時間和勞動力。

全自動核酸提取儀

二、全自動核酸提取儀的步驟
全自動核酸提取儀通過多個步驟實現(xiàn)核酸的提取和純化。主要步驟如下:

  1. 細(xì)胞破解
    將細(xì)胞或組織樣本加入破解液中,利用高速離心、超聲波或高壓力等方法破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,釋放出內(nèi)部的核酸。
  2. 核酸結(jié)合
    將破解后的樣本加入載體上的離心柱中,核酸會在pH、濃度等條件下與載體表面的材料結(jié)合。一般情況下,核酸結(jié)合后會與其他樣品成分分離開來。
  3. 洗脫雜質(zhì)
    加入洗脫液,洗去與核酸共沉淀的其他物質(zhì),使核酸得到純化。
  4. 洗滌與干燥
    通過多種液體、氣體的洗滌方式,將殘留在離心柱中的雜質(zhì)去除。
  5. 最終洗脫
    將洗滌后的離心柱加入溶解液,使結(jié)合在載體表面的核酸重新溶解出來。此處的核酸已經(jīng)獲得了高度的純化,可以用于后續(xù)分析或應(yīng)用。

三、全自動核酸提取儀的原理
磁珠法核酸提取儀一般分為抽吸法和磁棒法兩種 :

  1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的提取,一般通過操作系統(tǒng)控制機械臂來實現(xiàn)轉(zhuǎn)移。提取過程如下:
    1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現(xiàn)反應(yīng)液的混勻及充分反應(yīng),細(xì)胞裂解,釋放核酸。
    2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
    3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質(zhì),在外加磁場作用下,將液體移出。
    4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結(jié)合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
  2. 磁棒法
    磁棒法是通過固定液體,轉(zhuǎn)移磁珠來實現(xiàn)核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現(xiàn)核酸的提取。

四、全自動核酸提取儀的優(yōu)勢
全自動核酸提取儀的主要優(yōu)勢在于:
1.能夠?qū)崿F(xiàn)自動化、高通量操作。
2.操作簡單、快速。
3.安全環(huán)保。
4.高純度,高得率。
5.無污染,且結(jié)果穩(wěn)定。
6.成本低廉,便于廣泛應(yīng)用。
7.可以同時處理不同類型的樣本。

四、總結(jié)
全自動核酸提取儀是一種高效、精確的核酸提取工具。其原理基于多道分離、洗滌、結(jié)晶等步驟,通過自動化操作實現(xiàn)了快速、高通量的核酸提取過程。

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