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在現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中,自動(dòng)移液系統(tǒng)正逐步替代傳統(tǒng)手動(dòng)操作,提升實(shí)驗(yàn)效率與數(shù)據(jù)一致性。Opentrons 推出的 OT2 自動(dòng)移液工作站,因其開(kāi)源、易用和高性價(jià)比而深受全球科研機(jī)構(gòu)和生物實(shí)驗(yàn)室歡迎。然而,想要充分發(fā)揮 OT2 的性能,準(zhǔn)確完成實(shí)驗(yàn)操作,正確地進(jìn)行初始設(shè)置與全面校準(zhǔn)是關(guān)鍵第一步。
本篇文章將深入講解如何完整設(shè)置和校準(zhǔn) OT2,從開(kāi)箱到完成移液精度校正,幫助用戶輕松上手,確保 OT2 穩(wěn)定、高效運(yùn)行,尤其適合首次使用該平臺(tái)的實(shí)驗(yàn)人員參考。
一、為什么 OT2 的校準(zhǔn)至關(guān)重要?
OT2 是一款高度精密的自動(dòng)化移液設(shè)備,工作依賴于機(jī)械控制與傳感器系統(tǒng)對(duì)空間、液體體積及操作節(jié)奏的準(zhǔn)確把握。因此,即使出廠前已經(jīng)過(guò)預(yù)設(shè)參數(shù),用戶在自己的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上使用 OT2 前仍需重新校準(zhǔn),以適配所在實(shí)驗(yàn)室的耗材、臺(tái)面水平及具體實(shí)驗(yàn)設(shè)置。
良好的校準(zhǔn)能夠確保:
吸頭與耗材對(duì)準(zhǔn)精確,避免偏移或撞擊;
每次移液準(zhǔn)確執(zhí)行設(shè)定體積;
多輪實(shí)驗(yàn)中移液重復(fù)性穩(wěn)定;
高通量實(shí)驗(yàn)中樣本分布均勻、一致;
避免因位置誤差或滴液不全帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)失敗。
由此可見(jiàn),OT2 的校準(zhǔn)不僅僅是推薦步驟,更是穩(wěn)定運(yùn)行的基礎(chǔ)保障。
二、OT2 設(shè)置流程:從開(kāi)箱到啟動(dòng)
確保設(shè)備完整性并連接電源
首次打開(kāi) OT2 包裝,請(qǐng)確認(rèn)包含以下組成:主機(jī)本體、吸頭安裝器、USB 和電源線、吸頭支架、吸頭等實(shí)驗(yàn)耗材。連接電源后,按下 OT2 右側(cè)的電源按鈕,設(shè)備將進(jìn)入初始化模式,頂部環(huán)形燈亮起。
安裝 pipette(移液模塊)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,在 OT2 安裝單通道或 8 通道 pipette。使用 Opentrons App 或手動(dòng)按鈕控制機(jī)械臂,按照說(shuō)明插入 pipette,并進(jìn)行固定。
需注意左右安裝順序和匹配正確型號(hào),例如:右側(cè)只能安裝 GEN2 P300 單通道,左側(cè)對(duì)應(yīng) GEN2 P20 等。
連接控制軟件
可通過(guò) USB 或局域網(wǎng)將 OT2 連接至電腦。啟動(dòng) Opentrons App,自動(dòng)搜索并連接設(shè)備。此時(shí),OT2 將顯示在界面上,可進(jìn)入“設(shè)備”頁(yè)面進(jìn)行后續(xù)設(shè)置。
三、OT2 校準(zhǔn)的三個(gè)關(guān)鍵步驟
OT2 的校準(zhǔn)流程包含以下核心步驟,每一步都直接關(guān)系到移液精度與操作安全。
Deck 校準(zhǔn)(甲板校準(zhǔn))
Deck 是 OT2 工作平臺(tái)上的樣本和耗材放置區(qū)域。校準(zhǔn) deck 可以確保設(shè)備機(jī)械臂能準(zhǔn)確移動(dòng)到每一個(gè)位置(稱為 deck slot)。
在軟件中點(diǎn)擊“Calibrate Deck”;
安裝空 tip rack,在指定 deck 位中放置;
通過(guò)軟件控制 pipette 下移至 tip rack 頂部邊緣;
精細(xì)微調(diào)坐標(biāo),直到吸頭剛好接觸表面;
系統(tǒng)記錄該位置作為基準(zhǔn)點(diǎn)。
完成此步驟后,OT2 將能正確識(shí)別工作臺(tái)上每一個(gè) deck 位的位置。
Pipette Offset 校準(zhǔn)(機(jī)械臂偏移校準(zhǔn))
即使安裝正確的 pipette,不同批次、不同長(zhǎng)度的 pipette 也可能存在機(jī)械臂末端微小偏移。因此需要單獨(dú)校準(zhǔn) pipette offset。
在系統(tǒng)中選擇已安裝 pipette;
放置 tip rack 和 labware(如反應(yīng)板);
裝上吸頭并下移至 tip rack 最下層吸頭邊緣;
再移動(dòng)至 labware 表面,確保 tip 垂直貼合;
系統(tǒng)保存 XYZ 坐標(biāo)作為 pipette offset。
該步驟確保移液頭能垂直、安全地插入耗材中,不發(fā)生歪斜或漏液。
Tip Length 校準(zhǔn)(吸頭長(zhǎng)度校準(zhǔn))
不同品牌或批次的吸頭實(shí)際長(zhǎng)度存在偏差,校準(zhǔn) tip length 可避免誤差積累。
安裝對(duì)應(yīng) pipette 和 tip;
控制 pipette 下降至吸頭與校準(zhǔn)卡片平齊;
精細(xì)調(diào)節(jié)高度,直到 tip 剛好接觸卡片;
系統(tǒng)記錄此 tip 長(zhǎng)度。
經(jīng)過(guò)此步驟,OT2 能夠準(zhǔn)確識(shí)別吸頭在 XYZ 軸上的實(shí)際長(zhǎng)度,確保移液動(dòng)作上下精準(zhǔn)。
四、校準(zhǔn)后檢查與維護(hù)建議
完成上述三步校準(zhǔn)后,建議用戶:
運(yùn)行一個(gè)預(yù)設(shè) protocol(如分液測(cè)試),確認(rèn) pipette 工作正常;
觀察吸液和排液過(guò)程,是否有殘留或氣泡;
查看是否存在撞擊或錯(cuò)位現(xiàn)象,必要時(shí)重新校準(zhǔn);
每月進(jìn)行一次復(fù)查校準(zhǔn),或每次更換耗材品牌/批次后重新設(shè)置。
此外,注意保持 OT2 的機(jī)械臂潔凈,防止液體揮發(fā)或污染影響軌跡傳感器。軟件升級(jí)后,也需關(guān)注是否需重新進(jìn)行校準(zhǔn)。
良好設(shè)置是 OT2 穩(wěn)定運(yùn)行的前提
OT2 自動(dòng)移液工作站為實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)了前所未有的自動(dòng)化與靈活性,但只有在完成嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)置與精準(zhǔn)校準(zhǔn)之后,其性能才能真正發(fā)揮。OT2 的設(shè)置和校準(zhǔn)雖然步驟較多,但流程標(biāo)準(zhǔn)清晰,配合 Opentrons App 和可視化界面,操作過(guò)程對(duì)新手也極為友好。
科學(xué)地完成 OT2 的設(shè)置和校準(zhǔn),不僅能提升實(shí)驗(yàn)成功率,也能最大程度保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性與可靠性。
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