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全自動(dòng)移液工作站為ELISA實(shí)驗(yàn)帶來了顛覆性的革新。這款集智能化、自動(dòng)化與精確化特性于一身的設(shè)備,不僅極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作的復(fù)雜性,而且在提高實(shí)驗(yàn)效率、保障數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性以及降低人為錯(cuò)誤方面展現(xiàn)出了非凡的效能。本文旨在深入探討全自動(dòng)移液工作站如何在ELISA處理流程中充分發(fā)揮其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1、試劑和材料準(zhǔn)備:
配制所需溶液,并確保所有試劑均為分析純。
準(zhǔn)備ELISA試劑盒,包括96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)記物試劑、抗體溶液、顯色劑、終止液等。
準(zhǔn)備全自動(dòng)移液工作站所需的吸頭、適配器、托盤等配件。
2、儀器和設(shè)備檢查:
確保全自動(dòng)移液工作站、微孔板酶標(biāo)儀、離心機(jī)等設(shè)備處于良好工作狀態(tài)。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,設(shè)置全自動(dòng)移液工作站的參數(shù),如移液體積、移液速度等。
二、樣本處理
1、樣本稱取與稀釋:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,稱取適量樣品(如固體樣品需粉碎后過篩,液體樣品需搖勻后取樣)。
將樣品加入離心管中,并加入適量的提取液進(jìn)行稀釋。
2、樣本均質(zhì)與離心:
使用振蕩器或研磨機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行均質(zhì)處理。
將均質(zhì)后的樣品進(jìn)行離心處理,以獲取上清液。
三、全自動(dòng)移液工作站操作
1、試劑與樣本加載:
將處理好的樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)記物試劑、抗體溶液等放置在全自動(dòng)移液工作站的托盤與適配器中。
2、自動(dòng)移液與加樣:
全自動(dòng)移液工作站根據(jù)預(yù)設(shè)程序自動(dòng)取吸頭,吸取標(biāo)準(zhǔn)品或處理好的樣本,并精確加入到96孔板的指定孔位中。
依次加入酶標(biāo)記物試劑、抗體溶液等試劑。
3、孵育與洗滌:
將加好試劑的96孔板放入溫控孵育箱中,按照設(shè)定的溫度和時(shí)間進(jìn)行孵育。
孵育結(jié)束后,使用全自動(dòng)移液工作站配合洗板機(jī)對(duì)96孔板進(jìn)行洗滌,以去除未結(jié)合的試劑和雜質(zhì)。
4、顯色與終止:
加入顯色劑到96孔板中,并在室溫下暗處孵育一段時(shí)間。
孵育結(jié)束后,加入終止液終止顯色反應(yīng)。
四、結(jié)果檢測(cè)與分析
1、吸光度測(cè)量:
使用微孔板酶標(biāo)儀在設(shè)定的波長(zhǎng)下(如450nm或630nm)測(cè)量96孔板各孔位的吸光度值。
2、數(shù)據(jù)處理:
將測(cè)量的吸光度值輸入到數(shù)據(jù)處理軟件中,進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和樣品濃度的計(jì)算。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品吸光度值,計(jì)算出樣品中目標(biāo)分子的濃度。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)束與清潔
1、實(shí)驗(yàn)記錄:
記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,包括標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品濃度等信息。
2、設(shè)備清潔:
使用適當(dāng)?shù)那鍧崉┣逑慈詣?dòng)移液工作站和相關(guān)設(shè)備,確保下次實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
通過全自動(dòng)移液工作站進(jìn)行ELISA處理,可以大大提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率,減少人為誤差和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),全自動(dòng)移液工作站還具備高通量處理能力,能夠在短時(shí)間內(nèi)完成大量樣本的檢測(cè)。
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